Centrifugeuse à basse vitesse
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Centrifugeuse à basse vitesse

Les centrifuges de laboratoire sont basés sur le principe de la force centrifuge en physique. Lorsqu'un objet tourne autour d'un axe fixe de rotation, il éprouve une force extérieure, la force centrifuge. La taille de la force centrifuge dépend de la masse de la particule (M), la distance du ...
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Description

Paramètres techniques

A centrifugeuse à basse vitesseSpins pour créer une force centrifuge qui sépare les composantes de différentes densités dans un échantillon. Pendant la séparation des cellules, les cellules, les fragments cellulaires et d'autres biomolécules sont séparés à différents endroits par force centrifuge, selon leur masse et leur densité. Plus précisément, lorsque le tube de l'échantillon est tourné à grande vitesse à l'intérieur du rotor de centrifugeuse, la force centrifuge sur les différents composants du mélange est proportionnelle à leur masse et est également affectée par la vitesse et le rayon de rotation. Des cellules ou des particules plus grandes sont lancées vers le bas du tube de centrifugeuse, tandis que des composants plus petits restent dans la couche supérieure. Ce principe de séparation basé sur la densité et la masse fait des centrifuges à basse vitesse un outil idéal pour la séparation des cellules.

 

Procédure de centrifugeuse à basse vitesse dans la séparation des cellules

◇Préparation des échantillons: Tout d'abord, vous devez préparer l'échantillon de cellule pour être séparé. Cela comprend généralement des cultures cellulaires, des échantillons de sang ou d'autres échantillons biologiques contenant des cellules. Assurez-vous que l'échantillon a été correctement prétraité avant la centrifugation, tels que la dilution, la digestion ou la filtration.
◇ Sélectionnez le tube à centrifugeur droit: Sélectionnez le tube de centrifugeuse droite en fonction du volume de l'échantillon et de la force centrifuge requise.Centrifugeuse à basse vitesseS supportent généralement une variété de tubes à centrifugeuse, tels que 15 ml, 50 ml ou 100 ml. Assurez-vous que le tube centrifuge est de bonne qualité et scellé pour éviter les fuites pendant le processus centrifuge.
◇Équilibrer les échantillons: Avant de placer des échantillons dans la centrifugeuse, vous devez vous assurer que les échantillons dans tous les tubes à centrifugeuse sont de masse égale ou similaire. Cela peut être fait en pesant la masse de l'échantillon dans chaque tube à centrifugeuse. L'équilibre des échantillons est essentiel pour empêcher la centrifugeuse de générer des vibrations et du bruit pendant le fonctionnement.

low-speed centrifuge | Shaanxi achieve chem

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◇ Définir les paramètres centrifuges: Selon les exigences expérimentales, définissez la vitesse et le temps centrifuges appropriés. La plage de vitesse des centrifuges à basse vitesse se situe généralement entre 300 tr / min et 10, 000 RPM, et le temps peut être ajusté en fonction du type d'échantillon et de l'effet de séparation souhaité.
◇ Démarrer la centrifugeuse: Placer le tube à centrifugeur équilibré dans le rotor de la centrifugeuse et fermer la couverture de la centrifugeuse. Commencez ensuite la centrifugeuse et la centrifugeuse en fonction des paramètres définis. Pendant le processus de centrifugeuse, faites attention à l'état de course de la centrifugeuse pour vous assurer qu'il n'y a pas de vibration ou de bruit anormal.
◇ Collectez et traitez les échantillons après séparation: Après la centrifugation, fermez la centrifugeuse et attendez qu'elle s'arrête complètement. Le tube à centrifugeuse est ensuite soigneusement retiré et le surnageant et les précipités cellulaires sont collectés dans des conteneurs séparés à l'aide d'un outil approprié, comme une pipette. Selon les besoins de l'expérience, les précipitations cellulaires peuvent être nettoyées, cultivées ou analysées.

Considérations de centrifugeuse à basse vitesse dans la séparation des cellules

● Choisir la bonne vitesse centrifuge et le temps: Le choix de la vitesse et du temps est crucial pour l'efficacité de la séparation des cellules. Une vitesse de rotation trop élevée peut entraîner une rupture ou des dommages des cellules, tandis que trop longtemps peut entraîner une agrégation cellulaire ou des précipitations incomplètes. Par conséquent, la sélection des paramètres centrifuges doit être considérée en fonction du type, de la taille et de la densité des cellules.
● Assurer l'équilibre des échantillons: L'équilibre des échantillons est la clé pour empêcher la centrifugeuse de générer des vibrations et du bruit pendant le fonctionnement. Lorsque vous placez des échantillons, il est nécessaire de s'assurer que les échantillons dans tous les tubes à centrifugeuse sont de masse égale ou similaire. S'il existe une grande différence de qualité de l'échantillon, une quantité appropriée de tampon ou de solution saline normale peut être ajoutée au tube à centrifugeuse plus léger pour atteindre l'équilibre.
● Sélectionnez le tube à centrifugeur droit: La qualité et l'étanchéité du tube à centrifugeuses ont également un impact important sur l'efficacité de la séparation des cellules. Les tubes centrifuges de haute qualité ont une bonne résistance à l'étanchéité et à la corrosion, ce qui peut prévenir efficacement les fuites et la contamination des échantillons. Dans le même temps, la spécification du tube centrifuge doit également être sélectionnée en fonction du volume de l'échantillon et de la force centrifuge requise.
● Faites attention à l'entretien et à l'entretien de la centrifugeuse: Nettoyez régulièrement la chambre centrifuge et le rotor de la centrifugeuse pour éviter la contamination résiduelle de l'échantillon. Essuyez dans le temps après l'utilisation pour éviter la corrosion causée par les résidus liquides. Dans le même temps, il est également nécessaire de vérifier régulièrement le cordon d'alimentation et le bouchon et d'autres composants de la centrifugeuse pour s'assurer qu'ils sont intacts et éviter les risques de sécurité.

 

Application d'une centrifugeuse à faible vitesse en biotechnologie

● Traitement cellulaire en génie génétique: En génie génétique, les cellules doivent souvent être cultivées, transfectées, criblées et autres traitements. Les centrifuges à faible vitesse peuvent être utilisés pour des étapes telles que la concentration et le lavage des suspensions cellulaires, ainsi que pour la collecte de cellules après transfection. Par centrifugation, les impuretés et les cellules non transfectées dans le milieu de culture cellulaire peuvent être éliminées, et l'efficacité et la pureté de la transfection des gènes peuvent être améliorées.
● Purification et isolement des protéines: Dans la recherche sur les protéines, des protéines spécifiques doivent être purifiées à partir d'échantillons biologiques complexes. Les centrifugeuses à faible vitesse peuvent être utilisées pour la clarification initiale des solutions protéiques et l'élimination des impuretés, telles que les débris cellulaires, les acides nucléiques, etc. par traitement centrifuge, une solution de protéines relativement pure peut être obtenue, ce qui fournit la base des étapes de purification ultérieures.
● Isolement et purification des particules virales: Les particules de virus ont généralement une densité et une taille spécifiques et peuvent être séparées et purifiées par des centrifuges à basse vitesse. Par exemple, dans la recherche virologique, les particules virales peuvent être séparées des cultures cellulaires en utilisant une centrifugation différentielle. Cette méthode profite des différences dans les forces centrifuges à différentes vitesses pour séparer les particules virales des autres composants cellulaires.
● Production et contrôle de la qualité des médicaments biologiques: Dans le processus de production des médicaments biologiques, les centrifugeuses à basse vitesse sont souvent utilisées pour la clarification du liquide de culture cellulaire, l'élimination des débris cellulaires et la séparation initiale des médicaments. De plus, dans le contrôle de la qualité des médicaments, les centrifuges à faible vitesse peuvent également être utilisés pour détecter les indicateurs clés tels que la distribution de taille et la stabilité des particules de médicament.

 

Application d'une centrifugeuse à basse vitesse dans la séparation des particules virales

◇ Séparation primaire: Les centrifuges à basse vitesse sont souvent utilisés pour la séparation primaire des particules virales. Dans le processus d'extraction du virus, de grandes particules telles que les fragments cellulaires et les impuretés peuvent être éliminées par centrifugation à basse vitesse, et une suspension virale relativement pure peut être obtenue. Cette étape facilite les étapes de purification suivantes.
Enrichissement du virus: Dans certains cas, les centrifugeuses à faible vitesse peuvent également être utilisées pour l'enrichissement du virus. En ajustant le temps et la vitesse de la centrifugeuse, les particules virales peuvent être déposées au bas du tube à centrifugeuse, de sorte que l'échantillon de virus concentré peut être obtenu en extrait le surnageant. Cependant, il convient de noter que l'effet d'enrichissement des centrifuges à basse vitesse est relativement limité et pour des occasions où des virus de haute pureté sont nécessaires, d'autres méthodes de purification sont généralement nécessaires.

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Combiné avec d'autres méthodes de purification

● Méthode centrifuge différentielle: La méthode centrifuge différentielle est une méthode de séparation des particules de différentes tailles et densités en utilisant différentes vitesses et temps centrifuges. La centrifugation différentielle est souvent utilisée pour éliminer davantage les impuretés et concentrer le virus pendant la purification du virus. Après avoir éliminé de grandes particules telles que les organites par centrifugation à basse vitesse, les particules virales sont précipitées par centrifugation à grande vitesse.
● Méthode de centrifugation du gradient de densité: La méthode de centrifugation du gradient de densité est l'utilisation de milieux de différentes densités pour former un gradient, de sorte que les particules de densités différentes se déposent à différentes positions dans la méthode du gradient. Dans la purification du virus, la centrifugation du gradient de densité est souvent utilisée pour séparer les particules virales des autres impuretés de densité similaire (comme les protéines, les acides nucléiques, etc.). En préparant à l'avance le gradient de densité dans le tube de centrifugeuse, puis en ajoutant la suspension virale à la surface du gradient pour la centrifugation, les particules virales se déposeront dans une position spécifique dans le gradient pour former une zone de sédimentation.
● Méthode des précipitations: La méthode de précipitation est de précipiter les particules virales en ajoutant des réactifs chimiques. Les agents précipitants courants comprennent le sulfate d'ammonium, le polyéthylène glycol (PEG), etc. La méthode de précipitation peut être utilisée pour une purification supplémentaire du virus. En ajustant la concentration et la valeur du pH du précipitateur, les particules virales peuvent être précipitées sélectivement pour éliminer les impuretés.
● Méthode de filtration: La méthode de filtration est une méthode de séparation des particules virales des autres impuretés par colonne de chromatographie sur la filtration du gel. La colonne chromatographique du filtre du gel est séparée en fonction de la taille des particules, et les grandes molécules s'écoulent d'abord de la colonne chromatographique, et les petites molécules s'écoulent plus tard. En sélectionnant des conditions de gel et chromatographiques appropriées, les particules virales peuvent être efficacement séparées des autres impuretés.
● Méthode électrophorétique: La méthode électrophorétique est l'utilisation de l'action du champ électrique pour fabriquer des particules chargées dans la méthode de migration du champ électrique. Dans la purification du virus, l'électrophorèse est souvent utilisée pour séparer les particules virales des autres impuretés chargées. La séparation et la purification efficaces des particules virales peuvent être obtenues en sélectionnant les conditions et les milieux d'électrophorèse appropriés.

 

 

 

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